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引物合成
我们为高校、科研院所、医院、政府机构和医药诊断企业提供用于科学研究和研发生产用的引物产品。中选优生拥有符合生物医药诊断标准的洁净生产车间、先进的自动化生产设备、严格的质量控制体系和强大的研发创新能力。
常规引物合成:【快速引物】【高纯引物】【超纯引物】【修饰引物】
体外诊断引物及探针:【IVD qPCR引物】【IVD qPCR探针】
NGS引物:【NGS接头引物】【封阻引物(Blocker)】【杂交捕获探针】【多重PCR引物】
大规模Oligo合成:【大规模IVD引物探针合成】【克到公斤级Oligo原料合成】
预设计成品引物:【PCR/qPCR引物】【测序引物】【NGS引物探针】
质量控制
我们采用了全新的3D封闭式质控措施,分别在产成品QC质检、内部质量防控和定期质量跟踪三个维度进行闭环控制,不让任何不合格的引物产品流出。
严格且完备的内部质量控制
常规引物定量准确性测试
DNA合成前需要注意以下工作
设计引物序列:
根据您的实验目标,例如PCR扩增、基因克隆、测序等,设计合适的引物序列。
使用在线引物设计软件或手动分析,确保引物具有特异性,并且遵循引物设计原则,如避免引物间互补、避免引物内部形成二级结构等。
检查引物的GC含量、Tm值、引物长度等参数,确保它们在推荐的范围内。
验证引物序列:
使用BLAST或类似的数据库搜索工具,验证引物的特异性,确保它们不会与目标基因组中的非特定区域发生杂交。
如果可能,进行引物之间的交叉杂交验证,以进一步确认引物的特异性。
选择引物修饰:
根据实验需要,选择适当的引物修饰,如添加保护碱基、荧光标记、磷酸化等。
准备引物合成订单:
列出您需要的引物序列,包括正向和反向引物。
指定引物的修饰要求,如是否需要添加荧光标记或磷酸化等。
提供引物的预期长度和所需的合成量(通常是以OD值或摩尔数表示)
DNA合成过程中可能会出现多种常见问题,这些问题可能会影响合成的质量和效率。以下是一些常见的DNA合成问题及其可能的原因和解决方案:
合成效率低下:
原因:可能是由于引物设计不佳、引物序列中存在难以合成的碱基序列、合成反应条件不当等。
解决方案:优化引物设计,提高合成反应条件,例如调整反应温度、时间、pH值等。
引物纯度不足:
原因:引物合成过程中可能存在杂质,如未完全反应的原料、副产物等。
解决方案:采用高效的纯化方法,如HPLC纯化,以提高引物的纯度。
引物特异性差:
原因:引物序列设计不合理,存在与目标序列非特异性结合的风险。
解决方案:重新设计引物,提高引物的特异性,避免引物与目标序列中的非特异性区域结合。
引物稳定性差:
原因:引物序列中可能存在易降解的碱基或修饰基团。
解决方案:优化引物序列,避免使用易降解的碱基或修饰基团,提高引物的稳定性。
引物合成量不足:
原因:可能是由于引物设计过长、合成反应条件不佳、原料不足等。
解决方案:调整引物长度,优化合成反应条件,增加原料投入量等。
引物保存不当:
原因:引物保存条件不当,如温度过高、湿度过大等,导致引物降解或失效。
解决方案:确保引物在适宜的条件下保存,如低温、干燥等。
为了避免这些常见问题,建议在DNA合成过程中注意以下几点:
仔细设计引物序列,确保引物的特异性、稳定性和合成效率。
优化合成反应条件,包括反应温度、时间、pH值等,以提高合成效率和质量。
采用高效的纯化方法,如HPLC纯化,以去除合成过程中的杂质。
在引物保存过程中注意避免高温、湿度等不良条件,确保引物的稳定性和有效性。
此外,选择可靠的DNA合成服务商也是避免合成问题的关键。
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