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动物激素
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项目介绍

产品定义

动物激素(animal hormone)是由动物分泌细胞或内分泌腺分泌的一类信息传递物质。动物激素在动物的生长、性发育、营养代谢、细胞呼吸、生理代谢等生理过程中都发挥了非常重要的生理作用。


应用方向

1、标志物挖掘

2、激素的调节功能

3、激素的作用机制




项目案例

物激素分析的一般步骤:

  1. 提取:在室温下,从动物组织中提取激素。通常,会加入特定的溶剂(如乙酸乙酯)来提取激素,并通过涡旋混合和离心来分离和纯化激素。

  2. 净化:提取后,样品可能需要进一步净化以去除杂质和干扰物质。这可能涉及使用不同的溶剂和色谱技术。

  3. 定性和定量分析:使用质谱仪等仪器对提取和净化的激素进行定性和定量分析。这可以提供关于激素种类和浓度的信息。

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样品要求
样品类型送样量预处理和保存
动物组织≥200 mgPBS 洗涤去除残留血液和污染物,冲洗干净。用组织剪或手术刀将组织剪切成 1cm3 左右的小块,样品称重,等量分装。液氮速冻, -80°C 保存,干冰运输。
血清≥300 μL收集好的全血室温静置 30-60 min,或者 4°C 放置 2h,3000 g 离心 10 min,取上清,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
血浆≥300 μL收集好的全血加入抗凝剂(推荐采用肝素抗凝剂,不建议采用柠檬酸或者 EDTA),室温静止 30 分钟,1300g-2000g 离心 10min,取上清,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
尿液≥200 μL5000×g 4°C 离心 30-60min,取上清, -80°C 保存,干冰运输。
粪便≥300 mg新鲜粪便样本收集好后,立即用液氮速冻处理15 min,保存至-80℃冰箱
肠道内容物≥300 mg新鲜肠道内容物样本收集好后,立即用液氮速冻处理15 min,保存至-80℃冰箱
乳汁≥200 μL收集母乳,-80°C 保存,干冰运输。
唾液≥500 μL1000g-2000g 4°C 离心 10min,(或使用 0.22μm 滤膜过滤),取上清,-80°C 保存,干冰运输。
淋巴液、脑脊液、羊水、胆汁等体液≥200 μL1000g-2000g 4°C 离心 10min,(或使用 0.22μm 滤膜过滤),取上清,-81°C 保存,干冰运输。
穿刺样品≥500 mg收集样品,采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物(务必清洗干净!!),样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
软体动物组织≥500 mg收集样品,采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物(务必清洗干净!!),样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
悬浮培养细胞≥10^7离心收集悬浮细胞(保证每份收集的细胞数量一致!!),采用 PBS 清洗两遍,然后采用生理盐水(0.9%氯化钠溶液)洗一遍, 每次清洗后采用小于 1000g 离心力 4°C 低速离心 3 分钟,完全弃去上清(上述整个过程需尽量迅速操作),收集在 1.5ml 离心管中。液氮速冻后-80°C 保存,干冰运输。
贴壁培养细胞≥10^7收集培养好的贴壁细胞(保证每份收集的细胞数量一致!!)去除干净培养基,采用预冷的 PBS 洗两遍,然后再次加入预冷的PBS,把培养容器中的所有细胞都收集下来(一定要刮取干净!!),收集在 1.5 mL 离心管中, 4°C 低速离心,完全弃去上清(上述整个过程需尽量迅速操作)。细胞沉淀在液氮速冻后-80°C保存,干冰运输。
细胞培养上清≥10 mL1000 g,4°C离心3 分钟,取上清,-80°C 保存,干冰运输。


常见问题
    1. 1、样品准备:质谱检测需要高质量的样品。因此,确保样品的新鲜性、稳定性和代表性至关重要。样品的处理、存储和运输应尽量减少潜在的降解或修饰,以确保分析的准确性和可靠性。

    2. 2、样品的纯化和富集:动物激素通常存在于复杂的生物基质中,因此在进行质谱检测之前,通常需要对样品进行纯化和富集。这可以通过使用特定的色谱技术、免疫亲和柱等方法实现,以去除杂质并提高激素的浓度,从而增强质谱检测的灵敏度和准确性。

    3. 3、质谱条件优化:质谱检测的条件对于结果的准确性和可靠性至关重要。这包括选择合适的电离方式(如电喷雾电离ESI或化学电离CI)、优化质谱参数(如扫描范围、分辨率、碰撞能量等)以及选择合适的质谱仪器和检测器。通过优化这些条件,可以提高质谱检测的灵敏度和特异性。

    4. 4、质量控制:在质谱检测过程中,应严格控制各种潜在的干扰因素,如试剂的质量、仪器的性能、操作的规范性等。定期进行仪器的校准和维护,确保仪器的稳定性和准确性。同时,使用合适的内标或外标进行质量控制,以监测和分析过程的稳定性和可靠性。

    5. 5、数据解释:质谱检测产生的数据需要进行适当的解释和分析。这包括对质谱图谱的解读、对峰的识别和定量、对结果的统计和分析等。在解释数据时,应考虑样品的复杂性、激素的特异性以及与其他化合物的潜在干扰等因素。


 
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