一对一为您答疑解惑
立即扫码咨询
联系电话：15884474332
专业可信赖 · 硕博顾问团队
信用支付 · 先测试后付费
高性价比 · 保质又低价
做实验送积分 · 兑换海量好礼
报销无忧 · 正规合同发票
可提供报告 · 可申请
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）：SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰胺）凝胶电泳是一种可以根据蛋白质的分子量分离样本中蛋白的技术。蛋白质分子在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移率取决于所带净电荷及分子的大小和形状等因素。如果在聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS和巯基乙醇，则蛋白质分子的迁移率主要取决于它的分子量，而与所带电荷和形状无关。选择一系列不同分子量的球形或基本呈球形的蛋白质作为标准物，使其形成SDS复合物。把这些复合物在相同条件下进行电泳分离，分子量小的物质泳动距离大，分子量大的物质泳动距离小。测定出相对泳动率，用相对泳动率对蛋白质的分子量的对数作图，它们在一定范围内呈直线关系。因此可作为标准曲线来检测样品蛋白质的分子量。目前，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）主要应用在蛋白质分子量测定、特异性蛋白质检测、菌种鉴定等方面。
1.检测组织量要求为100mg（即黄豆大小）；
2.细胞量要求为10^6及以上，细胞收集方式—— 贴壁细胞：倒掉培养基，pbs清洗2-3次，用细胞刮收集细胞，2000g，离心5min，然后去掉上清液，细胞沉淀干冰运输； 悬浮细胞：2000g，离心5min，然后收集细胞沉淀，干冰运输；
3.血液样本：全血采用EDTA-抗凝管装，至少1ml，4度运输，血清或白细胞采用干冰运输；
4.剩余样本需要返还的项目,需要提前备注。
1.如何读取SDS-PAGE结果
电泳后肉眼无法观察到蛋白分离，需要后续的染色技术。考马斯亮蓝染色和银染是常规检测和定量电泳分离蛋白质的常用方法。经过固定-染色-脱色等简单处理后，可以清楚的观察到蛋白质的分布。
2.如何储存SDS-PAGE凝胶
通常在每次实验之前准备新鲜的SDS-PAGE凝胶。然而凝胶也可以在4℃的清水的储存约一周。如果凝胶染色后不能及时拍照，则需要将其放入水中，以防止凝胶干燥和收缩。建议尽快拍摄染色结果，如果凝胶长时间浸泡在水中，条带会散开
