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产品定义
犬尿氨酸（kynurenine）是由日本学者古武弥四郎和岩尾次郎发现在饲喂色氨酸的兔子尿液中发现了L-型犬尿氨酸，证明其是色氨酸降解途径中的关键中间代谢产品。犬尿氨酸参与色氨酸代谢、辅酶因子的生物合成以及非洲锥虫病等多个代谢途径，参与多种神经系统过程和疾病。使用LC-MS/MS平台可准确定性定量检测各类样本中的犬尿氨酸类靶向代谢物7种，该方法灵敏度高、准确性高且通量高。
技术路线
检测指标
编号 | 代谢物名称 |
1 | 犬尿氨酸 |
2 | 犬尿喹啉酸 |
3 | 喹啉酸 |
4 | 苯丙氨酸 |
5 | 酪氨酸 |
6 | 色氨酸 |
7 | 3-羟基犬尿氨酸 |
应用领域
肠道菌群代谢、神经调节、肿瘤代谢、畜禽机体免疫功能研究、药物靶点、药效评估、生理病理机制研究等
数据分析
| 样品类型 | 送样量 | 预处理和保存 |
| 动物组织 | ≥200 mg | PBS 洗涤去除残留血液和污染物，冲洗干净。用组织剪或手术刀将组织剪切成 1cm3 左右的小块，样品称重，等量分装。液氮速冻， -80°C 保存，干冰运输。 |
| 血清 | ≥300 μL | 收集好的全血室温静置 30-60 min，或者 4°C 放置 2h，3000 g 离心 10 min，取上清，液氮速冻，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 血浆 | ≥300 μL | 收集好的全血加入抗凝剂（推荐采用肝素抗凝剂，不建议采用柠檬酸或者 EDTA），室温静止 30 分钟，1300g-2000g 离心 10min，取上清，液氮速冻，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 尿液 | ≥200 μL | 5000×g 4°C 离心 30-60min，取上清， -80°C 保存，干冰运输。 |
| 粪便 | ≥300 mg | 新鲜粪便样本收集好后，立即用液氮速冻处理15 min，保存至-80℃冰箱 |
| 肠道内容物 | ≥300 mg | 新鲜肠道内容物样本收集好后，立即用液氮速冻处理15 min，保存至-80℃冰箱 |
| 乳汁 | ≥200 μL | 收集母乳，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 唾液 | ≥500 μL | 1000g-2000g 4°C 离心 10min，（或使用 0.22μm 滤膜过滤），取上清，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 淋巴液、脑脊液、羊水、胆汁等体液 | ≥200 μL | 1000g-2000g 4°C 离心 10min，（或使用 0.22μm 滤膜过滤），取上清，-81°C 保存，干冰运输。 |
| 穿刺样品 | ≥500 mg | 收集样品，采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物（务必清洗干净！！），样品称重，等量分装，液氮速冻，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 软体动物组织 | ≥500 mg | 收集样品，采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物（务必清洗干净！！），样品称重，等量分装，液氮速冻，-80°C 保存，干冰运输。 |
| 悬浮培养细胞 | ≥10^7 | 离心收集悬浮细胞（保证每份收集的细胞数量一致！！），采用 PBS 清洗两遍，然后采用生理盐水（0.9%氯化钠溶液）洗一遍， 每次清洗后采用小于 1000g 离心力 4°C 低速离心 3 分钟，完全弃去上清（上述整个过程需尽量迅速操作），收集在 1.5ml 离心管中。液氮速冻后-80°C 保存，干冰运输。 |
| 贴壁培养细胞 | ≥10^7 | 收集培养好的贴壁细胞（保证每份收集的细胞数量一致！！）去除干净培养基，采用预冷的 PBS 洗两遍，然后再次加入预冷的PBS，把培养容器中的所有细胞都收集下来（一定要刮取干净！！），收集在 1.5 mL 离心管中， 4°C 低速离心，完全弃去上清（上述整个过程需尽量迅速操作）。细胞沉淀在液氮速冻后-80°C保存，干冰运输。 |
| 细胞培养上清 | ≥10 mL | 1000 g，4°C离心3 分钟，取上清，-80°C 保存，干冰运输。 |
酶的作用和调节：犬尿氨酸循环中的关键酶包括吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）和肝脏色氨酸2，3-双加氧酶（TDO）。这些酶的活性和表达水平对犬尿氨酸循环的速率和程度具有重要影响。因此，在研究和应用犬尿氨酸循环时，需要关注这些酶的调节机制和影响因素，如炎症、应激、营养素等。
代谢产物的生理和病理作用：犬尿氨酸循环的代谢产物具有多种生理和病理作用。例如，犬尿喹啉酸和喹啉酸可以通过激活或抑制N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）参与神经调节和认知过程。在中枢神经系统疾病中，这些代谢产物的异常积累可能导致神经元损伤和功能障碍。因此，需要深入研究这些代谢产物的生理和病理作用，以及它们在疾病发生发展中的角色。
代谢平衡和调控：犬尿氨酸循环是色氨酸代谢的主要途径之一，与5-羟色胺（5-HT）的合成存在竞争关系。因此，在维持色氨酸代谢平衡和调控中，犬尿氨酸循环发挥着重要作用。在生理和病理条件下，需要关注犬尿氨酸循环与其他代谢途径之间的平衡和调控机制，以确保色氨酸代谢的正常进行。
个体差异和影响因素：犬尿氨酸循环的速率和程度存在个体差异，并受到多种因素的影响，如年龄、性别、遗传背景、饮食习惯等。这些因素可能导致犬尿氨酸循环的异常变化，进而影响个体的健康状况。因此，在研究和应用犬尿氨酸循环时，需要考虑个体差异和影响因素的作用，以确保结果的准确性和可靠性。
犬尿氨酸循环（犬尿氨酸途径）是色氨酸（TRP）代谢的主要途径之一。在这个循环中，色氨酸在吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）或肝脏色氨酸2，3-双加氧酶（TDO）的催化下，转化为犬尿氨酸（KYN），然后进一步代谢生成多种代谢产物，如犬尿喹啉酸和喹啉酸等。这些代谢产物通过不同的机制影响神经调节和认知过程，与多种中枢神经系统疾病的发生发展密切相关。以下是犬尿氨酸循环中需要注意的四个事项：
