一代测序与合成
100%满意度
DNA一代测序
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项目介绍

       一代测序由于操作简便,价格低廉,而且其准确度高,目前仍是测序的金标准。因为这些优势,一代测序仍然是目前应用最广泛的测序方法。我们在保证测序质量的前提下,努力改善测序的工艺流程,提高测序通量,推行自动化。平台拥有数百台Thermo  Fisher(以下简称“赛默飞”)旗下的 Applied BiosystemsTM  3730XL测序仪,能做到日处理100,000条以上的常规测序。


业务内容

CE测序:

      毛细管电泳测序(Capillary Electrophoresis,CE)是建立在原有的高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳序列分析法的基础上的一种测序方法。 主要是使用毛细管作为为分离通道、以可流动的聚合物为介质、用高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。平台目前使用的ABI 测序仪使用的就是毛细管电泳的测序原理,正常情况下测序的有效测序长度不低于700 bp,一般可达850 bp。

【克隆测序】、【Cosmid/Fosmid/BAC末端测序】、【复杂序列测序】、【STR、T-RFLP、AFLP、MLPA片段长度多态性检测】


技术优势

  1. 测序读长较长:平均测序读长较长,正常情况下(特殊样品除外),有效长度不低于700 bp,一般可达到850 bp;

  2.  速度快:收到样品后,最快24小时,即可收到测序结果;

  3.  有复杂序列测序的能力:可以显著提高ITR测序和Poly(A/T)等难度序列的测序成功率;

  4.  测序经验丰富:拥有20多年测序经验;

  5.  测序通量高:平均日处理100,000条常规测序;

  6.  测序网点遍布全国: 全国数十个测序网点可以保证大部分城市就近安排测序,节约物流时间。


测序质量保证

      基于标准化的生产流程和严格的质量控制流程,且在软硬件平台、配套试剂和设备维护保养校准均来自赛默飞原厂支持下。我们在“测序读长”、“测序QV值”和“复杂序列测序成功率”三个方面,给予客户高标准的数据和质量保证。


项目案例

平均测序读长较长,让您的数据分析更快捷。

坚持使用赛默飞原厂仪器及试剂,正常情况下(特殊样品除外),有效长度不低于700 bp,一般可达到850 bp

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测序QV值:高于中国药典标准,让您的数据更精准。

中国药典规定“对于质粒DNA测序峰图,去除引物后峰图的平均Q值需大于30Q值小于20,的碱基数占总碱基数的百分比需小于1%;对于PCR产物测序峰图,除需满足上述要求外,还需去除两端低质量序列,且剩余测序峰图的长度需大于PCR产物长度的50%。除特殊样品外,我们的QV值一般都在40以上,符合中国药典规则。

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样品要求
样本类型基本要求其他要求保存/运输条件预处理说明
PCR产物(已纯化/未纯化)
  • 样本量:

  • >=30 µl(未纯化)

    >=10 µl(已纯化)

  • 浓度:

  • >=100 ng/µl(未纯化)

    >=50 ng/µl(已纯化)

  • 样本量:OD260/280 1.8~2.0

  • 片段长度>=200 bp(如长度<200 bp,建议克隆后再测序)

  • 送样前建议取3 μl样品电泳,能清晰检出单一明亮目的条带;

  • 建议自带测序引物

4°C 冷藏运输
质粒
  • 样本量:>=20 µl

  • 浓度:>=100 ng/μl

  • 纯度:OD260/280 1.8~2.0

  • 有条件情况下建议提供200 μl含有相应质粒的菌液备用;

  • 需注明载体全称、插入目的片段长度、测序要求

液体质粒:4°C 冷藏运输 干粉质粒:常温运输
菌样(菌液/平板菌落)
  • 样本量:>=200 µl(菌液

  • 建议为过夜培养(12h)的新鲜菌液;

  • 尽量为高拷贝质粒,如为低拷贝质粒,建议直接提供质粒;

  • 需注明培养基、载体名称、是否需要诱导及抗性类型(除氨苄和卡那抗性,其余需自备);

4°C 冷藏运输菌液请放入EP管中,用封口膜封口,避免交叉污染 平板菌落请圈选标记,加缓冲垫以防运输中破损


常见问题
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