靶向代谢组学
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能量代谢
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项目介绍

产品定义

能量代谢维持着生命体最基本的生命活动,比如植物逆境和动物疾病通常伴随着严重的代谢紊乱,且大多归咎于能量代谢紊乱。能量代谢也影响着免疫细胞的功能和命运,与抗病和免疫应答有关。同时,蛋白质磷酸化的修饰基团来自于ATP,所以能量代谢异常可进一步导致上游蛋白质磷酸化通路的改变,严重影响生物体的各项生理、病理功能。能量代谢组学方法利用基于LC-MS的靶向代谢组方法对能量代谢相关的30多种代谢物进行绝对定量分析。


技术路线

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技术优势

1. 特异性、高准确性:采用MRM技术精确定性、绝对定量

2. 专属kit:高通量检测30多种参与能量代谢通路的代谢物

3. 严格质控:内标+外标,标准品人工校对,标曲R2>0.99


检测指标

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参与能量代谢通路的关键30多种代谢物,主要集中在TCA循环、糖酵解和氧化磷酸化通路。



项目案例

数据分析

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应用领域

糖代谢和能量代谢相关生理和病理研究



样品要求
样品类型送样量预处理和保存
动物组织≥200 mgPBS 洗涤去除残留血液和污染物,冲洗干净。用组织剪或手术刀将组织剪切成 1cm3 左右的小块,样品称重,等量分装。液氮速冻, -80°C 保存,干冰运输。
血清≥300 μL收集好的全血室温静置 30-60 min,或者 4°C 放置 2h,3000 g 离心 10 min,取上清,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
血浆≥300 μL收集好的全血加入抗凝剂(推荐采用肝素抗凝剂,不建议采用柠檬酸或者 EDTA),室温静止 30 分钟,1300g-2000g 离心 10min,取上清,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
尿液≥200 μL5000×g 4°C 离心 30-60min,取上清, -80°C 保存,干冰运输。
粪便≥300 mg新鲜粪便样本收集好后,立即用液氮速冻处理15 min,保存至-80℃冰箱
肠道内容物≥300 mg新鲜肠道内容物样本收集好后,立即用液氮速冻处理15 min,保存至-80℃冰箱
乳汁≥200 μL收集母乳,-80°C 保存,干冰运输。
唾液≥500 μL1000g-2000g 4°C 离心 10min,(或使用 0.22μm 滤膜过滤),取上清,-80°C 保存,干冰运输。
淋巴液、脑脊液、羊水、胆汁等体液≥200 μL1000g-2000g 4°C 离心 10min,(或使用 0.22μm 滤膜过滤),取上清,-81°C 保存,干冰运输。
穿刺样品≥500 mg收集样品,采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物(务必清洗干净!!),样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
植物种子、果肉≥200 mg收集样品,样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
草本植物、藻类、蕨类≥200 mg收集样品,采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物(务必清洗干净!!),样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
植物花粉≥50 mg收集样品,样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
植物体液≥300 μL5000×g 4°C 离心 30-60min,取上清,-80°C 保存,干冰运输。
软体动物组织≥500 mg收集样品,采用 PBS 洗涤去除样品表面泥土或污染物(务必清洗干净!!),样品称重,等量分装,液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
低等细菌细胞≥10^9离心收集等量菌体(保证每份收集的菌体细胞数量一致!!),采用 PBS 清洗三次,每次清洗后 5000g 4°C离心 5 分钟,完全弃去上清,收集在 1.5ml 离心管中。液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
菌体(真菌类)≥500 mg收集菌体(保证每份收集的菌体数量或者重量一致!!),采用 PBS 清洗三次,每次清洗后 5000g 4°C 离心 5 分钟,完全弃去上清,收集在 1.5ml 离心管中。液氮速冻,-80°C 保存,干冰运输。
悬浮培养细胞≥10^7离心收集悬浮细胞(保证每份收集的细胞数量一致!!),采用 PBS 清洗两遍,然后采用生理盐水(0.9%氯化钠溶液)洗一遍, 每次清洗后采用小于 1000g 离心力 4°C 低速离心 3 分钟,完全弃去上清(上述整个过程需尽量迅速操作),收集在 1.5ml 离心管中。液氮速冻后-80°C 保存,干冰运输。
贴壁培养细胞≥10^7收集培养好的贴壁细胞(保证每份收集的细胞数量一致!!)去除干净培养基,采用预冷的 PBS 洗两遍,然后再次加入预冷的PBS,把培养容器中的所有细胞都收集下来(一定要刮取干净!!),收集在 1.5 mL 离心管中, 4°C 低速离心,完全弃去上清(上述整个过程需尽量迅速操作)。细胞沉淀在液氮速冻后-80°C保存,干冰运输。
细胞培养上清≥10 mL1000 g,4°C离心3 分钟,取上清,-80°C 保存,干冰运输。


常见问题
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