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免疫电镜测试（IEM）
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免疫电镜技术是组织样品经低温脱水渗透LR White树脂低温聚合包埋，超薄切片70-80nm，用特异性一抗与待检测抗原结合然后用带有胶体金标记的二抗与一抗抗原复合物结合，在电子显微镜下观察，由于二抗上的胶体金形成一定的电子密度而精确指示出相应抗原在亚细胞水平上的定位。
免疫电镜技术成功的关键是：
①对细胞超微结构的完好保存；
②保证被检细胞或其亚细胞结构的抗原在原位，其抗原性不受损失；
③选择的免疫试剂能顺利穿透组织细胞结构与抗原结合。
该技术主要用于病毒、细菌等抗原定位、免疫性疾病的发病机理及超微结构免疫细胞化学研究等。
具体操作方法：
1、1-3min内取样，取样组织1mm3大小。取材前可提前准备装有免疫电镜固定液A液的培养皿，将小组织块离体取下后立即投入培养皿内，用手术刀在培养皿的固定液中进行切割成 1mm3的小组织块。再将切割好的小组织块转移至装有新的免疫电镜固定液的EP管内继续固定。
2、取材时尽量精确到需要观察的目的部位(如观察肾小球取肾皮质;观察胰岛取胰岛丰富的胰尾;皮肤，肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)。
3、取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤，刀片要锋利避免挫伤组织。
4、组织取下后立即投入免疫电镜专用固定液，4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。样品固定后应尽快安排做后续包埋和免疫标记实验，减少抗原丢失的可能性。
5、结果观察图像采集：在透射电子显微镜下观察并采集图像，黑色10nm大小的金颗粒即为阳性表达。
免疫电镜测试（IEM）是一种将免疫组织化学技术与透射电镜技术相结合的方法，用于在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位。以下是关于免疫电镜测试（IEM）的一些常见疑问及其解答：
什么是免疫电镜测试（IEM）？
免疫电镜测试（IEM）是一种利用抗原与抗体特异性结合的原理，在超微结构水平对样品进行定位、定性和定量研究的技术。它结合了免疫组织化学技术与透射电镜技术的优点，能够提供关于抗原或抗体在细胞或组织中的精确定位信息。
免疫电镜测试（IEM）的主要应用是什么？
免疫电镜测试（IEM）在生物学和医学研究中具有广泛的应用。它可以用于研究细胞器、病毒、蛋白质复合物等超微结构的抗原或抗体定位，以及病毒性疾病的诊断和病原体鉴定等。此外，IEM还可以用于未知抗原的早期诊断和研究细胞间的相互作用等。
免疫电镜测试（IEM）的样品制备过程是怎样的？
免疫电镜测试（IEM）的样品制备过程通常包括固定、脱水、包埋、切片和免疫标记等步骤。首先，样品需要经过适当的固定和脱水处理，以保持其结构和抗原性。然后，样品被包埋在支持膜上，并进行超薄切片。接下来，利用特异性抗体对切片进行免疫标记，以显示目标抗原的位置。最后，将标记后的切片置于透射电镜下进行观察和分析。
免疫电镜测试（IEM）的优势是什么？
免疫电镜测试（IEM）的优势在于其高度的特异性和敏感性。通过利用特异性抗体与抗原的结合，IEM能够在超微结构水平对目标抗原进行精确定位，并提供高分辨率的图像。此外，IEM还可以结合不同的标记方法，如胶体金标记、免疫铁蛋白技术等，以增加可视化和定量的准确性。
免疫电镜测试（IEM）的局限性是什么？
免疫电镜测试（IEM）的局限性主要包括操作繁琐、耗时较长以及对样品的损伤较大等。样品制备过程中需要经历多个步骤，包括固定、脱水、包埋等，这些步骤可能会对样品的结构和抗原性造成一定的影响。此外，IEM需要高技能的操作人员和昂贵的仪器设备，限制了其在一些实验室的普及和应用。
