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扫描电镜SEM
平均7个工作日已预约23724次
扫描电子显微镜（SEM）是一种利用电子束扫描样品表面并获取其表面形貌和组成信息的显微镜。它具有高分辨率、大景深、视野广、成像立体感强等优点，被广泛应用于材料科学、生物学、医学等领域。
SEM的基本原理是，通过极狭窄的电子束扫描样品表面，电子束与样品相互作用产生各种效应，其中主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品表面放大的形貌像，这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的，即使用逐点成像的方法获得放大像。
相比透射电镜和光学显微镜，SEM具有介于它们之间的分辨率和成像特点。它可以直接观察各种试样凹凸不平表面的细微结构，试样制备简单，放大倍数可在2-20万倍之间连续可调，具有很大的景深和视野，成像富有立体感。
在生物学领域，SEM被广泛应用于细胞生物学、组织学和病理学等领域。例如，可以使用SEM观察细胞表面的超微结构、细胞间的相互作用、细胞与基质的相互作用等。此外，SEM还可以用于观察病毒、细菌等微生物的形态和结构，为医学研究和临床实践提供支持。
服务流程：
送样要求：
可接收固定好的细胞/组织样品并附有详细送检要求的送样单
①需要您提供的样品：收集细胞/组织取样（新鲜迅速取材），置于1.5ml离心管内，加入2.5%的戊二醛溶液（固定液加满离心管，使样品完全浸没在固定液中），放置于4℃保存，请不要倒弃固定液，一般固定12h后可寄送（务必采用1.5ml离心管寄送）。
②打印填写完整的预约单、送样单和样品一起寄送。
样品取材及固定常用方法：
细胞类 | 106以上的细胞，用细胞刮刀刮下来，1500-3000转离心，5-10min，收集细胞于1.5ml或2ml离心管，管底肉眼可见2-3粒大米状样品，如果细胞量很多，把细胞团块用细针尖挑成几个小团块，弃上清，沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液，固定液完全浸没样品，可放置于4°C保存。 |
组织类 | 新鲜取材，取材位置准确，组织大小尽量在1-2mm³，离体取材后请尽快投入4℃预冷的固定液中，固定液完全浸没组织，可放置于4°C保存。 |
细菌类 | 吸取OD0.5-0.8的培养物，离心后弃培养基，收集菌体沉淀于管底黄豆大小，可以用PBS洗1-2次，齐上清，沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液，固定液完全浸没样品，可放置于4°C保存。 |
*如样品取材及固定有疑问请及时与我们沟通 交付内容： 每样提供8张拍摄图片（不提供分析服务），如需照片数量超过8张将产生额外费用； 结果反馈请在测试完成一周内，不建议回收样品，如有需要请提前反馈给指南针工作人员。 | |
市售25%戊二醛水溶液 10ml
0.2M磷酸盐缓冲液（pH7.0） 50ml
蒸馏水加至 100ml
2. 0.2M，pH7.0磷酸缓冲液的配置方法？
A液：Na2HPO4·H2O 31.61g，或者Na2HPO4·7H2O 53.63g，或者Na2HPO4·12H2O 71.64g，加蒸馏水至1000ml
B液：NaH2PO4·H2O 27.6g，或者NaH2PO4·2H2O 31.21g，加蒸馏水至1000ml
0.2M，pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml（合起来是100ml）
3. 为什么要加固定液？
固定液是为了保持细胞、组织的固有形态和结构。
4. 扫描电镜制样流程？
新鲜取材后用2.5%戊二醛固定液固定样本，4℃过夜放置，倒掉2.5%戊二醛固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用1%的锇酸溶液固定样品1-2h；小心取出锇酸废液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；用梯度浓度（包括30%，50%，70%，80%，90%和95%五种浓度）的乙醇溶液对样品进行脱水处理，每种浓度处理15min，再用100%的乙醇处理两次，每次20 min。用乙醇与醋酸异戊酯的混合液（V/V=1/1）处理样品30min，再用纯醋酸异戊酯处理样品1h或放置过夜。临界点干燥。镀膜，观察。处理好的样品在扫描电镜中观察。
